W skład Urzędu wchodzą następujące komórki organizacyjne:
1) Biuro Prezesa;
2) Biuro Administracyjno-Finansowe;
3) Biuro Współpracy Międzynarodowej;
4) Departament Praw Pasażerów;
5) Departament Regulacji Rynku Kolejowego;
6) Departament Nadzoru;
7) Departament Bezpieczeństwa Kolejowego;
8) Departament Zezwoleń Technicznych i Interoperacyjności;
9) Kancelaria Główna;
10) Wieloosobowe Stanowisko do spraw Audytu Wewnętrznego;
11) Stanowisko do spraw Ochrony Informacji Niejawnych;
12) Stanowisko do spraw Bezpieczeństwa i Higieny Pracy oraz Przeciwpożarowych;
13) Rzecznik Prasowy.
W skład UTK wchodzą również oddziały terenowe z siedzibą:
1. w Warszawie, działający na obszarze województw mazowieckiego, łódzkiego i podlaskiego,
2. w Lublinie, działający na obszarze województw lubelskiego i świętokrzyskiego,
3. w Krakowie, działający na obszarze województw małopolskiego i podkarpackiego,
4. w Katowicach, działający na obszarze województw śląskiego i opolskiego
5. w Gdańsku, działający na obszarze województw pomorskiego, warmińsko-mazurskiego i kujawsko-pomorskiego,
6. we Wrocławiu, działający na obszarze województw dolnośląskiego i lubuskiego,
7. w Poznaniu, działający na obszarze województw wielkopolskiego i zachodniopomorskiego.